Les levures ⇒ Forcer une levure à sporuler ?

[Penn-Maen]

Bonjour,

les micro-organismes sous forme de spores peuvent se conserver trèèèès longtemps, même à température ambiante.
Je me demandais s'il était possible de forcer nos levures à sporuler, afin de les conserver après décantation dans des solutions d'eau déminéralisée/distillée ?
Si oui, je suppose qu'il faut un milieu riche en carbonates, pour constituer la "coquille" de la spore ? (désolé, je n'ai probablement pas le vocabulaire exact)

Suis-je dans le vrai et dans le domaine des possibles, ou est-ce encore une idée tordue ?

Merci.

[HeyJoLetsJo]

La sporulation consiste en une forme de résistance pour les levures, donc il leur faut plutôt un milieu pauvre afin que les levures soient en condition difficile et sporulent.

La dernière fois que j'ai fait sporuler des levures c'était sur milieu YPA, tu peux toujours essayer de chercher la composition exacte du milieu si ça peut te donner des idées...

Après de là à ce que ça soit faisable facilement chez soit je sais pas.

[Penn-Maen]

google n'a rien trouvé sur le YPA (je n'ai probablement pas les bonnes clef).

En fait, j'ai lu (ici et sur le HTB) qu'il était possible de conserver, à température ambiante, des levures lavées dans un tube avec de l'eau bouillie. Comme le milieu est donc très pauvre, j'en déduit que cette opération les fait sporuler, sans pour autant en être certain.

Il me semble que pour sporuler, les cellules de levures ont besoin de carbonates. D'où mon idée de rajouter des carbonates à l'eau pour faciliter la sporulation, moins taper dans les réserves des levures (elles ne doivent pas disposer d'un gros stock de carbonates) et augmenter les possibilités de conservations.

Si les experts peuvent me contredire, ou pas ...

[Jessi-James]

J'ai trouvé ça sur google (première recherche premier resultat)

ça va surement vous aider :

http://www.pasteur.fr/recherche/unites/ ... lation.pdf

[Penn-Maen]

ouais, c'est bien ce que je pensais : pas les bons mots clef ("composition milieu culture YPA" dans mon cas)

Merci du doc
(bon, je ne comprend déjà pas tous les mots du titre, et dans le premier paragraphe, seuls les mots de moins de 4 lettres sont connu de mon vocabulaire, mais je pense m'en sortir quand même )

D'ailleurs, en explorant l'arborescence de ton lien, j'ai trouvé aussi le document joint (on y trouve divers milieu de culture, dont un adapté à la conservation à -80°C) : ça peut servir à ceux qui veulent se faire une banque de levure

[HeyJoLetsJo]

Bon je reviens sur ce que j'ai dit, j'ai retrouvé le TP en question...

Le milieu de sporulation utilisé était en fait le milieu ACK (composition : 10g d'acétate de potassium, 20g d'agar) donc un milieu assez pauvre.

L'idée de la sporulation est d'induire la méiose chez les levures, les spores étant les "gamètes" des levures. Mais pour avoir cette méiose il faut une souche diploïde (possédant chacun de ses chromosomes en double) et c'est là que je ne sais pas vraiment comment faire. Les levures nous étaient fourni à partir d'un croisement fait cette fois sur un milieu complet (milieu YPG : 10g extrait de levure, 10g peptone de viande, 20 g glucose, 20g agar). Les deux souches croisées étaient de base haploïde (une seule copie des chromosomes) et de signes sexuel différents.

J'ai absolument aucune idée de comment déterminer le signe sexuel d'une levure, mais c'est ainsi que nous a été présenté le TP.

[Penn-Maen]

j'ai trouvé cet article
Visiblement, la présence d'ion calcium est un pré-requis.

[Nezahualcoyotl]

j'ai trouvé cet article
Visiblement, la présence d'ion calcium est un pré-requis.

Penn,

Tu fais erreur. Ils parlent de floculation et non de sporulation!! L’ascospore de S. cerevisiae n'est pas une coquille d’œuf composé de carbonate de calcium!! Il s'agit plutôt de complexe de polyosides et des glucoproteines , à caractère très hydrophobes.

Nezahualcoyotl

[TAU]

j'ai trouvé cet article
Visiblement, la présence d'ion calcium est un pré-requis.

Dans cet article ils indiquent que les interactions VdW/electrostatic (theorie DLVO) ne sont apparemment pas majoritairement responsables de la stabilité colloidale des levures, à part dans des cas extrêmes. Donc ce que j'évoquais sur le post "action du froid" et que tu as fais resurgir récemment, est clairement imprécis et incomplet ... mea culpa

[Penn-Maen]

@Nezahualcoyotl : ah merde, oui (faut vraiment que je réapprenne à lire moi). Tu as un avis sur mon idée à la con de stocker des levures sporulées ?
@TAU : j'ai compris la deuxième phrase (mais pour la première, faut que je tatouille Google pour qu'il traduise)