Les levures ⇒ Congelation, petites questions

[Penn-Maen]

10 et 30% pour quelle température ?

[benbilou]

Pour les bactéries c'est 10% pour passer à l'azote liquide (en passant par une étape de descente progressive dans de l'isopropanol mis dans un -80°C): clairement inadapté pour ici.

Par contre pour les levures, elles sont plus "résistantes" à la toxicité de l'agent cryoprotectant, donc tu fous direct l'ampoule au congélo. Nous on utilise un -80°C, met le -20°C marche tout aussi bien (sûrement qu'au bout de 3-5 ans tu auras plus de mal à les relancer que si elles avaient été à -80°C, mais bon).

[BIBITTE]

La température d’ébullition est de 290° et le glycerol se transforme à 171°.

Donc en gros le faire bouillir c'etait con comme idée.
Par contre je peux le chauffer a un peu plus de 100° pour le stéreliser. Est-ce une bonne idée ou le glycerol faut pas le faire chauffer?

10 et 30% pour quelle température ?

De ce que j'avais lu sur ce forum les conseils etaient 15-25% pour une température de -18 (congelo domestique) si tu a les moyens de faire plus froid c'est mieu mais les doses de glycerol je ne les connais pas.

Dans mes interrogations il me reste encore un point :
Il est preferable de laisser sedimenter les levure avant d'ajouter le glycerol?
Si oui:
- je complete ensuite avec du mout tout neuf (plein de sucre) et 20% de glycerol ?
- ou direct 20% de glycerol sur les levures sedimentées pour avoir une concentration en levure plus elevée ?

[LaBrasserieDuNico]

Hello,

j'ai cliqué sur un lien dans un sujet qui n'avait rien à voir (Kegs chinois je crois) et je suis tombé la dessus... C'est super intéressant !!!
Si ça peut aider... http://lacapsuledupanda.com/index.php/2 ... de-levure/

[Penn-Maen]

@bibitte :
il me semble que le coyote conseille de faire un mélange entre 50/50 et 25/75 glycérol/moût neuf @1.040/1060
Ensuite, pendant que tes levures sont en pleines phase exponentielle (krausen), tu les mets au frigo : elles sédimentent en étant pleines de réserves (tréhalose + un autre sucre). Le moût contenant encore du sucre et pas trop d'alcool, les petites bêtes sont en pleine forme.
Ensuite, tu vides une partie du surnageant, tu les remets en suspension, puis tu ajoutes ton mélange mout/glycol volume à volume, tu secoues, tu remets au frigo 24 h avant de mettre au congélo.

Assures-toi que ton congèl n'est pas à dégivrage automatique. Mets tes tubes dans une boite en PSE avec par exemple un pain de glace.

Edit : après lecture, l'article de Panda est vraiment bien, et la méthode est probablement plus pratique que celle que j'expose.

[BIBITTE]

merci a tous pour vos conseils.

Au final j'ai à peu prés suivit le process du lien fourni par LaBrasserieDuNico.

J'ai préparé un mélange Glycérol/Mout réparti dans mes tubes de 50ml, dans chaque tube j'ai mis 10-12ml de glycérine et j'ai complété avec du mout fraîchement brassé jusqu’à 25ml.
Ensuite, après avoir ensemencé mon brassin avec mon pied de cuve, j'ai réparti le fond du pied de cuve dans mes tubes jusqu'a 50ml et j'ai mis tout ça au frais.

Pour les prochaines fois ce que je dois changer:
- sortir le pied de cuve plus tôt du frigo parce que c'est long d'attendre qu'il se réchauffe alors que t'as fini de brasser.
- préparer les tubes avec le mélange glyréol/mout bien en avance parce qu'une fois stérilisés ils sont super chaud et j'ai du attendre super longtemps avant de pouvoir y mettre mes levures.

Voila je déterrai ce post quand j'aurai tenté de réveiller ces petites bestioles.