Les levures ⇒ congélation des levures

[Nezahualcoyotl]

ou encore mieux quelques années sans mutations a température ambiante dans l'eau distille stérile.

Exacte, mais seulement quelques années, car si j'ai bon mémoire de l'article, l'auteur décrit surtout cette technique pour C albicans avec une étude sur 15 ou 18 ans , mais il est beaucoup plus réservé pour S cerevisiae . De plus aucune résultat est donné sur le taux de mutant apparaissant!

Alors oui , une excellent méthode de conservation , peu onéreuse, à notre portée , mais pour quelques années ( et là l'auteur de l'article n'est pas plus explicite ).

Christophe, précis

[Mbrew]

Pas de mutants dans la mesure ou dans l'eau les levures ne se multiplient pas...

effectivement cette methode de conservation ne permet pas d'obtenir avec SC les 15 ans et plus obtenus pour d'autres organismes, certaines etudes montrent quand meme 100 % des echantillons repartant apres 60 mois a temperature ambiante

[Jean-Luc]

Donc simples tubes à essai avec eau distillée dans lesquels on répartit nos levures liquides à l'arrivée ?
Intéressant çà.

----Orthographe vérifiée par PHP et Aspell----

[Mbrew]

Donc simples tubes à essai avec eau distillée dans lesquels on répartit nos levures liquides à l'arrivée ?

la quantite de levure doit etre infime (l'eau doit a peine etre troublee) pour bien faire il faut reprendre une petite colonie sur agar (1-2 mm de diametre) dans 2-3 mL d'eau

[choussinga]

Comme le répéte Mbrew, vous ne pouvez espérer congeler des culots de levure dans le but d'ensemencer un brassin directement.
Je considére la congélation comme un moyen d'archivage des souches. Conservez vous souches à +4° sur milieu solide ( mieux ,plusieurs mois ) ou en mieux liquide ( quelques semaines ) pour débuter un nouveau starter en vue d'un brassin .
Christophe

J'ai cultivé des levures à partir de fond de bouteilles de bière commerciales. Après une semaine de starter, elles avaient bien repris et semblaient prêtes à être ensemencés mais seulement voilà, le brassin est reporté de 4 semaines...
J'ai placé les starters dans mon unité de garde qui oscille entre 1 et 2°C dans le but de m'en servir pour le prochain brassin.
Je compte les réactiver une semaine à l'avance en les replaçant à 25°C et sur agitateur magnétique et/ou avec un aérateur de mout.

Je pense que la procédure est ok et qu'elle devraient être opérationnelles mais si vous avez des objections merci de m'en faire part (je courrerai alors les sortir de mon frigo).

[Cede]

Normalement les levures peuvent se garder au delà d'un mois au frigo.
Au cas ou, vaut mieux refaire un petit starter 24-48H avant

[choussinga]

Je ferai un retour sur l'expérience

[Cede]

J'ai reçu des tubes de culture et j'ai mis à refroidir hier une souche de 1007 pour ensuite passer au stade congélation.
Quand j'aurais reçu mon matériel de labo, je tenterais un levain avec une souche congelée.

[leurne]

Je dépoussière aussi ce topic fort interessant.
Je pense me lancer dans la culture de levure et faire des milieux gélosés du genre mout + agar agar (mout que je prépare spécialement pour l'occase en faisant quelques litres à 66°C 60 min puis ébullition pendant 5/10 min pour stériliser). Le tout dans une bouteille et je conserve.
Les boites de pétries je pense en prendre à l'école, l'agar-agar ca se trouve en grande surface je crois donc pas de souci.

Les tubes à hémolyse aussi de l'ensaia je pense.

Mes milieux de cultures seront essentiellement liquide avec la technique de l'eau distillée stérile (enfin je pense plutot travailler avec de la tryptone sel pour pas foutre une baffe au bestiole).
Je pense concretement faire comme ça:

-Une goute dans un tube stérile + tryptone sel (5 mL)
-conservation à 4°C
==Quand j'en ai besoin==
-je preleve (genre 1mL ou moins) que je mets dans un tube + mout stérile
-le tube+mout stérile à 20°C
-4h après, je prélève et je fais un isolement sur boite pour vérifier la gueule de mes colonies
si tout est bon, le mout + mout stérile finit dans un starter pour le brassin.

Les boites de pétris, je les ferais pas tout le temps... Si je manipule tout à l'ENSAIA, vu le matos que j'aurais, il n'y aura aucun risque (et je pense faire tous les tubes + eau stérile en double ou en triple). Si je manipule chez moi, vu que j'aurais pas autant de matos, je ferais une boite pour vérifier.

J'attends vos commentaires, savoir ce que vous en pensez et si c'est réalisable.

[Nezahualcoyotl]

Je dépoussière aussi ce topic fort interessant.
je prépare spécialement pour l'occase en faisant quelques litres à 66°C 60 min puis ébullition pendant 5/10 min pour stériliser

Peu orthodoxe et encore moins orthopraxe ! Où nous as tu pêché cela? Pour ma part en microbiologie la stérilisation d'un liquide c'est 20 minutes à 121°C.
Maintenant , si tu ne travailles pas trop salement, les probabilités seront peut-être en ta faveur.

Nezauhalcoyotl, non-stérile