Les levures ⇒ congélation des levures

[Nezahualcoyotl]

Pourquoi se faire ch... à congeler ces levures suivant des protocoles, certes pas très compliqués, mais bon avec quand-même un risque de ne plus rien voir redémarrer, alors que la déhydratation est la façon la plus sûre d'obtenir une conservation longue et extrêmement efficace d'un point de vue de la viabilité?...

Dans nos laboratoires , nous conservons nos souches congélées. La déshydratation est un peu plus complexe , pour ce qui est du protocole et la reprise n'est pas toujours aussi bien assurée .
Que cela soit la congélation ou la déshydratation , il est nécéssaire de psséder de bonnes conditions de conservation ( systéme de surveillance des congélateurs , cellement sous atmosphère neutre et séche - azote - pour la déshydratation ) .

Christophe, conservateur?!! O non!!!

[blackloffy]

fram a écrit:
Un congélo, en général, tout le monde en a un à la maison... par contre pour déshydrater les levures je suppose qu'il faut du matos... (en fait j'en sais rien... mais toutes les brasseries que je connais conservent leur souches de levure congelée).


Rien de compliqué à la déshydratation, j'étale mes levures sur une plaque aseptisée et je la place dans un endroit chaud 35°c maxi.

fram a ecrit:
Puis dans le même ordre d'idée : pourquoi se faire ch... à brasser de la bière alors qu'on en trouve pas cher dans les supermarchés!

Noooonn!! la bière pas chère elle est pô bonne!!!
sinon elle n'est pas à moins de 3 euros le 3/4...

Ok, ma réaction était un peu stupide, c'est pas plus simple de sécher les levures que de les congeler et puis c'est pas plus bête de les congeler que de les déshydrater.... mea culpa

[Nezahualcoyotl]

[quote="blackloffy"]
Rien de compliqué à la déshydratation, j'étale mes levures sur une plaque aseptisée et je la place dans un endroit chaud 35°c maxi.
quote]

Je ne pense pas que tu obtiendras de bons résultats ainsi . Le process en labo est fort éloigné de celui que tu proposes. Mais l'as tu essayé?

Christophe, Yeastman

[Daniel]

De toute façon c'est intéressant de connaître les différentes formules de conservation des levures
Quel érudition

[Godé]

J'ai vu un post sur la congélation des levures sur un site américain,
Il parlait d'une solution de glycerine, pour que la membrane de la cellule de levure n'éclate pas. Perso je n'ai jamais essayé.

[Nezahualcoyotl]

Glycérin = glycérol = 1,2,3 Propanetriol

Exact pour la congélation des bactéries et levures.

Christophe, encore au labo

[blackloffy]

Rien de compliqué à la déshydratation, j'étale mes levures sur une plaque aseptisée et je la place dans un endroit chaud 35°c maxi.
quote]

Je ne pense pas que tu obtiendras de bons résultats ainsi . Le process en labo est fort éloigné de celui que tu proposes. Mais l'as tu essayé?

Christophe, Yeastman

oui mais pas avec les levures pour la bière, je l'ai fais avec le levain de mon pain. Je vais essayer avec une wyeast.

[marti]

25 à 50 % de glycerol c'est bien trop et une trop grande proportion finira pas avoir un effet toxique sur les levures.
15 à 25 % correspond à ce qu'on utilise dans les laboratoires pour la congelation des bacteries et des levures.

De mon expérience, 25 % c'est le minimum pour une conservation indéfinie.
Mister G m'a confié des levures en 2004, je les ai congelées à 25% de glycérol. Aucun soucis!!!
Pour mes bactéries , je conserve certains clones depuis plus longtemps encore.
Je prépare une slotion nutritive ( mais peu importe en réalité ) à 50 % glycérol et mélange volume à volume avec les cellules en phase exposentielle de croissance ( en pleine forme donc ) et congélation directe.

Christophe, -196°C , le luxe quoi!?

je me lance dans la congélation ..

donc si je résume :

aujourd'hui je prépare des falcons de 50ml de levures que j'ai amplifié.
ce qui me donne un dépot de 15~20 ml de levures .

pour congeler, il faut mettre 25% de glycérine soit 12,5ml dans mon falcon de 50ml ?
j'avais en mémoire 30% de glycérine dilluée à 50%

la vérité est ailleurs ?

[Nezahualcoyotl]

Bonjour Marti,

Dans mon laboratoire je procéde ainsi :
à partir d'une solution stérile de milieu de culture plus 50% ( v/v) de glycérol
j'ajoute volume à volume cette solution, à mes levures en pleine phase de croissance , concentration finale de glycérol donc de 25%
j'aliquote ( optionnel , mais fortement recommander suivant les tubes que tu possédes )

Christophe, You, Tubes!

[Mbrew]

je me lance dans la congélation ..

donc si je résume :

aujourd'hui je prépare des falcons de 50ml de levures que j'ai amplifié.
ce qui me donne un dépot de 15~20 ml de levures .

pour congeler, il faut mettre 25% de glycérine soit 12,5ml dans mon falcon de 50ml ?
j'avais en mémoire 30% de glycérine dilluée à 50%

15 a 25 % marchent bien

congeler permet d'archiver et de stocker des souches mais ne permet pas une reutilisation directe des levures

Si tu n'as pas de -80 et que tu veux faire de la conservation a long terme, une methode tres efficace est de reprendre quelques levures (moins d'une colonie sur agar) dans quelques mL d'eau distillee sterile. Tu peux ensuite garder tes tubes a temperature ambiante plusieurs annees et avoir suffisement de levures vivantes pour reensemencer une boite.
cette methode donne de meilleurs resultat qu'une congelation a - 20 dans un congelateur classique