Les levures ⇒ Durée de centrifugation

[Jinac]

Salut les brassams-biologistes !

Il se trouve que la clinique où je bosse jette en ce moment milles trésors (j'en récupère pas mal mais ça fend le coeur de voir ce qui part à la benne...notre société "moderne" est folle...bref passons)

J'ai donc récupéré une centrifugeuse en parfait état de marche qui monte à 3000 tours minutes et qui accepte des tubes de 10mL.
Je pense donc que je pourrais passer mes levures à la centrifugeuse et donc augmenter la quantité par tube.

La question est donc, à quelle vitesse et combien de temps ?

Il me semble avoir lu 2500 tour/min pendant 5 min mais je suis pas du tout sur de moi.

Bref, si certains d'entres-vous ont une info...


Merci d'avance et bonne soirée !

[Guiguish]

Salut,
Oui effectivement dans les labos il y a beaucoup de gaspillage...
Ce que je fais classiquement en culture cellulaire c'est 1500rpm 10 à 12 min pour obtenir un culot.
Amusé toi bien !

[goulven]

Salut Jinac, c'est un outil dont je suis à la recherche également… Attention quand même, la centrifugeuse (avec l'autoclave) fait partie des premières cause d'accident en labo. Si l'appareil a été mis au rebu, il y a peut être une raison donc méfiance quand même, renseigne toi bien. Sinon, c'est bien intéressant de pouvoir récupérer des choses comme ça, surtout quand on voit le tarif de certains appareils.

[Guiguish]

Tout à fait d'accord avec Goulven, il faut faire très attention et bien équilibrer le rotor. Même si à cette vitesse à priori la centrifugeuse ne devrait pas faire des bons de 2m!

[Jinac]

Alors je l'ai testé dans ma grange à 3 m de tout objet en augmentant très lentement la vitesse... elle tourne nickel !

Après elle a eu sa dernière révision en 98 et celle de 2000 n'a pas été faite, je pense que c'est juste un vieux coucou qu'ils ont remplacé... Si vous saviez ce qu'ils jettent... ( pour les curieux : crédence inox de 2m50, grada lumière neuf, plonge inox, évier inox, étagère inox j'en passe et des meilleures...

En tout cas merci pour les infos !

[goulven]

pour les curieux : crédence inox de 2m50, grada lumière neuf, plonge inox, évier inox, étagère inox j'en passe et des meilleures...

C'est arrivé chez toi j'espère.

[Jinac]

oh que oui...mais je vais bloquer niveau place...
Et il reste des trésors...des lits électriques qui marchent, des étagère, console, fauteuil... snif.


Bref, j'ai plus qu'à me fabriquer des support pour accueillir des tube de 50mL pour mettre dans les nacelles.
Dessus y' marqué "capacité maximum 6x100mL, et y'a 4 nacelles sur le rotord. Je pense que je vais mettre un tube par nacelle histoire de pas surcharger la bête bien qu'elle semble increvable...

Le dispositif de fermeture marche encore, la sécurité antiouverture aussi... le vieux timer mécanique présente quelques faiblesses donc je ferais ça au chrono mais ça m'a l'air pas mal.

[Cede]

Intéressant.
6x100ml ça commence à être une grosse bête

Je regarde aussi pour une centrifugeuse afin de concentrer le culot avant la mise en solution pour la congélation.

[goulven]

Salut Cede, je dévie un peu du sujet mais tu est à quel pourcentage de glycérine? pour de la congélation standard (-18°) je suppose?

[Jinac]

dixit les précédent échange notamment avec nezal :

Pour un congélateur traditionnel à -18°C
- Préparer une solution à environ 15% de glycérol
o Mélanger 1 volume de glycérol pour 2 volumes d’eau stérile (33% de glycérol)
o Mélanger 1 volume de liquide ainsi obtenu à 1 volume de levure (16.5% de glycérol)
- Mettre dans des tubes puis au congélateur

Pour un congélateur de laboratoire à -80°C
- Préparer une solution à environ 25% de glycérol
o Mélanger 1 volume de glycérol pour 1 volume d’eau stérile (50% de glycérol)
o Mélanger 1 volume de liquide ainsi obtenu à 1 volume de levure (25% de glycérol)