Les levuresun peu de biologie ?

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Landru
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un peu de biologie ?

Message par Landru »

Quelqu'un a-t-il déja essayé de visualiser les cellules mortes au microscope ?
On m'a dit qu'avec du bleu de méthylène on pouvait les voir : les cellules mortes se gorgeraient de bleu de méthylème tandis que les vivantes seraient imperméables.

Mon premier teste n'a rien donné ....
Tout est bleu au microscope
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Re: un peu de biologie ?

Message par rufala »

Apres le grand bleu, Landru, vous propose un nouveau long métrage : ça s'appelle le petit bleu. Une aventure houblonesque d'un passioné de fond de cuve.
Bientot sur vos écrans.
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Re: un peu de biologie ?

Message par nico »

D'après mes sources, cela marcherait plutot avec du cristal violet, un autre colorant. L'idée est que les levures vivantes peuvent excréter le colorant tandis que les mortes l'accumulent. C'est pas facile à mettre en place car il y 1 coloration de base. Si tu as accès à des boîtes de culture, c'est plus fiable mais déjç ua microscope, tu peux voir les levures bourgeonner, signe de multiplication et de bonne survie. Si aucune ne montre de bourgeon, mauvais signe.
Bonne manips,
nico,
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Re: un peu de biologie ?

Message par nico »

D'après mes sources, cela marcherait plutot avec du cristal violet, un autre colorant. L'idée est que les levures vivantes peuvent excréter le colorant tandis que les mortes l'accumulent. C'est pas facile à mettre en place car il y 1 coloration de base. Si tu as accès à des boîtes de culture, c'est plus fiable mais déjç ua microscope, tu peux voir les levures bourgeonner, signe de multiplication et de bonne survie. Si aucune ne montre de bourgeon, mauvais signe.
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Re: un peu de biologie ?

Message par Nezahualcoyotl »

Bonjour,

Désolé, mais afin de visualiser les cellules mortes , il faut utiliser une solution de bleu Trypan ( à 0.4 % ) que l'on dilue vol. à vol avec les cellules.

Le cristal violet en solution colore les cellules vivantes .

Christophe , au laboratoire
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Re: un peu de biologie ?

Message par a.giorgio »

http://www.eurobio.fr/PDF/EAUCOL00_trypan.pdf
bonne chance pour le matos si tu veut les voirent
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Re: un peu de biologie ?

Message par rufala »

Il faut un grossissement de combien pour observer des levures ?

Un microscope "jouet" permet-il de les observer ?

Merci les biologistes du fofo.
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Re: un peu de biologie ?

Message par a.giorgio »

1000 c'est bien donc un jouet c'est une peu trop petit pour faire l'affaire car se sont généralement des loupes
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Re: un peu de biologie ?

Message par Oliv »

Landru a écrit :les cellules mortes se gorgeraient de bleu de méthylème tandis que les vivantes seraient imperméables.
Raté, c'est l'inverse !
Les cellules vivantes accumulent le bleu, alors que les mortes sont de la même couleur que le fond.
Si tout est bleu, c'est que tout est vivant.

Pour voir les cellules vivantes il y a aussi le test d'exclusion de l'Iodure de Propidium, ou de la 7-amino-actinomycine D, ou encore l'import de la Fluorescéine-di-acétate ou du dihydroethidium. Mais bon je doute que vous ayez dans votre garage un microscope à fluorescence.
"Aaaah, la la la la, on n'a pas des vies facile, hein, quand même !"
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Re: un peu de biologie ?

Message par Nezahualcoyotl »

Bonjour Olivier,

Tu fais bien de spécifier pour le blue de méthyléne, car avec le bleu Trypan ce n'est pas le cas.
Ces méthodes ne nécéssitent en effet pas de matériel semi lourd, comme tu l' ajoutes.

Christophe
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