Les levures[EXP] Densité levures et volume réensemencement

Saccharomyces chéries... cerevisiae, carsbergensis, bruxellensis, ...
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Dab2
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Re: [EXP] Densité levures et volume réensemencement

Message par Dab2 »

Hello,

Je remonte le post après m'être intéressé aux résultats de cette expérience (merci romain0814 et Nezahualcoyotl d'avoir fait les tests et d'en avoir partagé les résultats !).

Je comprends donc que :
- la levure récoltée (après lavage et sédimentation) a été diluée 12 fois, l'éprouvette n°1 correspondant à la première dilution : remplissage à moitié de levure puis à moitié d'eau.
- évaluer 1 millions de celulles / mL dans la 12e éprouvette (seuil de turbidité) signifie qu'on avait 4,1 milliards de cellules / mL de sédiments avant dilution.
- en réalité, après comptage, il y avait 0,12 millions de cellules / mL dans la 12e éprouvette et environ 1,5 milliards de cellules / mL de sédiments avant dilution.

Lorsqu'on fait le calcul de dilution, on se rend compte qu'on ne tombe pas sur les 12 dilutions au facteur de 2 tout rond, mais sur 12 dilutions au facteur 2,19. On est quand même pas loin, le comptage est globalement cohérent avec l'expérience effectuée.

Par ailleurs, le Coyotl précise qu'après centrifugation des levures reçues, il obtient 1,88 milliards de cellules / mL contre environ 6,7 milliards de cellules / mL pour sa production (soit un facteur 28 %).
Ça confirme bien que dans nos sédiments de récupération on trouve toutes sortes d'autres choses que des levures. Ça explique aussi en partie que romain0814 ait atteint le seuil de turbidité pour seulement 0,12 millions de cellules / mL : si le reste des sédiments avait été des levures on aurait été plus proche des 0,5 millions de cellules / mL.

Les conclusions que j'en tire :
- je n'utiliserai pas la technique de la turbidité : le seuil est trop subjectif (une erreur de plus ou moins 50 % semble facilement possible) et il y a trop de risques de se tromper sur les facteurs de dilution (une petite erreur a de grosses conséquences), sans compter le temps qu'il faut y passer. Si on utilise cette méthode dans le cas de la récupération de levures d'un brassin précédent, il faut dans tous les cas tenir compte du fait que la turbidité ne sera pas liée qu'aux levures mais également à d'autres sédiments : dans notre cas il aurait fallu diviser par environ 3,5 le résultat obtenu.
- dans le cas d'une récupération d'un brassin précédent, et après lavage des levures, le ratio d'environ 1,5 milliards de cellules / mL de levures sédimentées est bien confirmé dans le cas de cette expérience.
- dans le cas d'un starter (levures plus en forme mais sans lavage), j'aurais tendance à dire qu'on est au-dessus, mais il faudrait faire l'expérience pour s'en assurer ! En attendant je garde le ratio d'1,5 milliards de cellules / mL de sédiments, je verrai si c'est cohérent avec les estimations des calculateurs.
- les levures obtenues en laboratoire ont une concentration bien plus importantes que les nôtres, jusqu'à 7-8 milliards de celules / mL de sédiments, c'est confirmé par les dires du Coyotl, du bouquin Yeast et des infos White Labs.

Merci encore pour cette source d'infos ;)