Les levures ⇒ Culture des levures

[Nezahualcoyotl]

Bonjour,

L'agar posséde un bon pouvoir gélifiant et est utilisé dans nos laboratoire de microbiologie depuis de très nombreuses années de par sa facilité d'obtension. Voilà pourquoi il est communément cité.

Il est utilisé à raison de 15 g / l .

Maintenant , pour ne pas les avoir essayés, je ne peux te conseiler pour d'autres produits alternatifs.

De combien as tu besoin en agar?

Christophe

[Jean-Luc]

de quoi remplir 5 ou 6 boites et une douzaine de tubes...
jgab a écrit sur son site qu'il trouve çà en magasins bios...

"La bière est la preuve indéniable que Dieu nous aime et veut nous voir heureux."
Benjamin Franklin

[Nezahualcoyotl]

je comprends ton utilisation pour les boites, mais pour les tubes????

L'avantages des boites , c'est qu'elle confére une grande surface d'échange , donc les clones poussent bien mieux qu'en milieu liquide ( une colonie peut représenter plusieurs milliards d'individus..... )

Donc , 100 g sufirait?

Autre astuce: poser un sparadrat sur le pourtour de la boite de Pétri , car outre la contamiation bactérienne, l'autre danger , surtout quand on désire conserver ces cultures c'est la pousse de champignon sur ses boites.

Christophe

[Jean-Luc]

dans le cas de récupération de levures, les boîtes sont utiles pour tenter de séparer ensuite les cultures.

pour les tubes : conservations des souches distinctes... pour préparation ultérieure de starters.

est ce toi qui congèle tes levures ? pas de souci de ruptures des cellules ?

"Une pinte de bière est un met de roi !"
William Shakesbeer

[Jean-Luc]

une autre question :
toi qui semble au fait de ces manipulations et expériences, existe t'il un moyen, a ton avis, de différencier des souches de levures ?

microscope ?
couleur ?
forme ?
sélection par température ?
autre ?

"C'est un bon vent qui a poussé les hommes vers la bière."
Washington Irving

[Nezahualcoyotl]

Alors tu n'as pas besoin de mettre du milieu gélifié dans tes tubes.

Les colonies sur gélose ( type milieu YPD agar ) se conservent deux mois à +4°C . Tu en prélèves pour ensemenser ton milieu liquide .

L'idéal est de conserver ses souches congelées, mais là tout le monde ne bénéfie pas un congélateur à - 80°C.

Zut je suis démasqué! oui c'est moi le resposable d'une banque de levure !!

j'en reparlerai un peu plus tard....

Il existe certainement des "marqueurs" qui différencieraient les variétés de levure que nous utilisons. Mais je ne pense pas que certaines soient thermosensibles ou dépendantes de la composition du milieu ... Il ne serait pas très facile pour nous , brasseur amateur , de les différencier compte tenu des tests à mettre en place ( milieu sélectifs? , test immunologie ) .

Voilà pour faire simple et rapide ce que je peux t'affirmer à une heure si avancée...

christophe qui retourve ses cellules , dans 6 heures! zut !!!

[brewdusud]

Démasqué christophe, tu travail donc dans le milieu de la biologie cellulaire?
C'est ca qu'est facinant car avec chancun de nos metiers, on peut tous améliorer nos technique de brassage et connaissance.
Que c'est bien l'échange des connaissances.

[zoologue]

CD Pritchard décrit sa mathode de congélation, qui utilise un kit de culture de levure (a priori vendu pour la fabrication de vin), qui permet à nous autres non biologistes d'avoir les bons ingrédients, et un protocole opératoire beaucoup plus simple que les manipulations de labo, qui moi me rebutent (désolé Christophe :

http://hbd.org/cdp/freezyea/freezyea.htm (en anglais)

Quelqu'un saurait-il où se procurer ce type de kit ?
Pour le truc à mélanger, c'est une solution de glycérine, et ça, on en trouve facilement.
Pascal

[Nezahualcoyotl]

Par expérience, la conservation de microorganisme à -20°C n'est viable que quelques mois; autre considération : la décongélation/congélation diminue aussi la viabilité de vos cultures stockées.

Si vous désirez vous lancer dans l'expérience, voilà ce que je vous conseille:

préparer un milieu de culture ( malt ) avec 50% glycérine ,
cultiver vos levures une nuit dans un milieu ( malt 1020-1040 ) ,
le lendemain,mélanger volume à volume les deux solutions
mettre au congélateur en répartisant dans plusieurs récipients, à -20°C

pour ré-ensemenser, décongeler sur de la glace vos levures, rélever un petit volume et mettre dans un starter.

n'oubliez pas de travailler le plus prprement possible.

Christophe, qui peut faire simple aussi