La fermentation ⇒ refermentation en bouteille : sucre ou levure ou les 2 ?

[Jodet]

Magnifique, j'attends avec impatience ce pdf qui je pense fera de nombreux heureux pour Noël ! (ou après... )

Dernière question :

Je dispose d'un spectrophotomètre visible (JENWAY 6400) qui me permettrai de faire des dosages (IBU,EBC...) Connais-tu un fournisseur de réactif pour faire ces analyses ?

[magnus3]

je vais regarder pour les reactif vu que je dispose de smethode EBC pour les dosages cités
concernant le bleu trypan je sais que c'est très utilisé pour les celulles animales et humaines et medecine /cancéro
mais je 'en ai jamais entendu parler pour compter des levures,

la methode au bleu de methylène est plus facile à mettre en oeuvre et plus courante.

avec ton spectro en mesurant l'abosorbance à 600nm de ta bière, tu pourra etablir avec ton microscope une relation DO = F (levure en suspension)

[Jodet]

Si j'ai bien compris, en mesurant l'absorbance d'une solution connue (après comptage au microscope), je peux en déduire une relation me permettant la fois suivante de déterminer ma concentration en levure rien qu'avec l'absorbance (Densité Optique) de mes autres échantillons ?

[PVE]

J'ai essayé le bleu trypan, cela fonctionne. Les cellules mortes ou mal en point prennent la coloration, les autres non. Reste à déterminer s'il donne des résultats identiques au bleu de méthylène : la sensibilité des cellules n'est pas forcément la même vis-à-vis du colorant.
A ce propos, quelle concentration de bleu de méthylène utilises-tu ? faut-il le préparer à l'eau distillée ou avec une solution isotonique ?

[magnus3]

Si j'ai bien compris, en mesurant l'absorbance d'une solution connue (après comptage au microscope), je peux en déduire une relation me permettant la fois suivante de déterminer ma concentration en levure rien qu'avec l'absorbance (Densité Optique) de mes autres échantillons ?

un dessin vaut parfois mieux qu'un grand discours :



Pour PVE :
comme quoi on en apprend tous les jours, mais après tout la levure étant eucaryote (comme nous) pourquoi cela ne fonctionnerait-il pas
Pour le bleu de methylène la concentration est de 1.1mM (0.35g/L) dans une solution citrate. DIlution au 1/2 avec la suspension de levure.
et pour le trypan tu procède comment?

[PVE]

Je vais répondre vite pour ne pas polluer le sujet.
Je prépare 4 tubes avec des dilutions différentes.
1/10; 1/100, 1/1000; 1/10000.
Je commence le comptage avec le tube le plus dilué. Je prélève 100 µl dans ce tube et je mélange avec 100 µl de bleu trypan dans un tube Ependorff et j'homogénéise le mélange.
Je prélève et je monte dans une cellule de Malassez, j'observe au microscope (objectif 40) en comptant les cellules non bleues -30% forfaitaires.
Le résultat est multiplié par le facteur de dilution puis par 2.
Cela me donne le nombre de cellules vivantes par µl.

Voilà .

Hommage au passage à Christophe Pichon.

Si des discussions devaient se poursuivre, je pense qu'un nouveau sujet serait plus adapté.

[magnus3]

ouep d'accord avec toi
la technique est la même le colorant change

pour le topic c'est une bonne idée
on le cree et on pourrait y mettre une espece de protocole