Bonsoir à tous,
Merci Christophe pour tes précisions relatives au citrate de sodium.
J'ai entendu dire que l'on pouvait fabriquer soi-même le fameux Trypan, mélange "assez stable" si concentré.
En connaîtriez-vous la composition ?
Merci,
Bien cordialement,
jean-louis
Les levures ⇒ photo de levures au microscope
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jl972
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Re: photo de levures au microscope
Bonjour Jean Louis,jl972 a écrit :Bonsoir à tous,
Merci Christophe pour tes précisions relatives au citrate de sodium.
J'ai entendu dire que l'on pouvait fabriquer soi-même le fameux Trypan, mélange "assez stable" si concentré.
En connaîtriez-vous la composition ?
Merci,
Bien cordialement,
jean-louis
Qu'entends tu par "fabriquer"? synthétiser??
Tu peux te constituer une solution de bleu Trypan à partir de la poudre . La mienne est a 0.4% , soit de fois concentrée.
Si tu en as besoin , contacte moi en MP pour quelques ml , sachant que j'en utilise quelques 20 à 50 µl par comptage.
Cordialement
Christophe, de garde
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Re: photo de levures au microscope
http://cgi.ebay.fr/ws/eBayISAPI.dll?Vie ... 26_fvi%3D1dany06hd a écrit :en effet j'ai fait cette photo dans la hâte...j'essayerai d'approfondir avec le temps.
Un excellent microscope, prix modeste pour le moment . M^me sir les frais de port sont élevés.
Moi, je ne peux rien proposé sous 500 € et c'est déjà 5 fois inférieur au matériel neuf de laboratoire ( pour une qualité identique !!)
Christophe, de garde
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Re: photo de levures au microscope
je viens de retrouver une photo prise à l'arrache (objectif apn contre objectif microscope) faite pendant mon stage dans une grande brasserie, la coloration vitale est uniquement réalisée avec du bleu de méthylène.. ça marche déjà pas mal....
coloration vitale sur lame de Thoma
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PVE
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Re: photo de levures au microscope
Voilà ce que ça donne : j'ai laissé des levures dans un tube fermé pendant plusieurs mois. Bien-entendu elles sont toutes mortes. C'est ce que révèle le bleu trypan : toutes sont colorées.
De profundis
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alex73
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Re: photo de levures au microscope
Pourquoi n'ont-elles pas toutes la même couleur ?
Il me semble qu'il en ai certaines qui sont transparentes non ?
si tel est le cas, il en reste quelques-unes de vivantes et la culture peux repartir non ?
Il me semble qu'il en ai certaines qui sont transparentes non ?
si tel est le cas, il en reste quelques-unes de vivantes et la culture peux repartir non ?
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PVE
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Re: photo de levures au microscope
La différence de coloration vient probablement du fait que je n'ai pas suffisamment agité après mise en contact avec le colorant. Il y a des parties qui ont été plus exposées au bleu que les autres.
Mais dès lors qu'il y a changement de coloration (bleu, verdâtre, jaunâtre ...) cela indique qu'une partie au moins du colorant a pénétré dans la cellule.
Même en absence de coloration, on considère qu'il y a déjà 25% de cellules non colorées qui ne sont plus viables. Alors, je ne risquerais pas ne serait-ce qu'un quart de litre de pied-de-cuve sur la tête de ces levures. Heureusement qu'il existe des moyens de conservation !
Quant-à savoir si le bleu trypan est un colorant vital, ce que certains nient, il faut considérer ceci :
Une coloration vitale est généralement faite avec du rouge neutre, bleu de méthylène ... très dilués qui ne sont pas incompatibles avec la vie.
Le bleu trypan ne tue pas les cellules, il se contente de pénétrer dans les cellules mortes ou moribondes. Alors vital ou pas ?
Mais dès lors qu'il y a changement de coloration (bleu, verdâtre, jaunâtre ...) cela indique qu'une partie au moins du colorant a pénétré dans la cellule.
Même en absence de coloration, on considère qu'il y a déjà 25% de cellules non colorées qui ne sont plus viables. Alors, je ne risquerais pas ne serait-ce qu'un quart de litre de pied-de-cuve sur la tête de ces levures. Heureusement qu'il existe des moyens de conservation !
Quant-à savoir si le bleu trypan est un colorant vital, ce que certains nient, il faut considérer ceci :
Une coloration vitale est généralement faite avec du rouge neutre, bleu de méthylène ... très dilués qui ne sont pas incompatibles avec la vie.
Le bleu trypan ne tue pas les cellules, il se contente de pénétrer dans les cellules mortes ou moribondes. Alors vital ou pas ?